美洲栗子项目
进度报告2021

接近一万棵树

2020年11月1日至2021年11月30日期间开展的活动

今年是令人兴奋的一年，达林美洲板栗收获最大. 这将使我们目前在田间试验中的树木总数增加到5165棵，其中2018棵 是达令58美洲栗树，以及它们的三代后代， 正在接受美国政府审查.S. 联邦监管机构向公众发布 森林恢复计划. 因此，即使面临来自……的持续挑战 包括供应链延迟和额外的安全协议， 感谢您一直以来对我们工作的支持，这一年我们的工作仍然卓有成效 研究小组. 虽然我们已经取得了许多研究成果(见出版物) 为使本年度的报告简明扼要，我们将重点介绍 林木的多样化、生产和调控进展.

异交授粉和组织培养- Hannah Pilkey(生产经理)

这个授粉季节是一个特殊的一年，纳入新的母树 和花粉类型促进遗传多样性的转基因育种计划. 下面 是一个带项目符号的摘要:

• 丰富的花粉和丰富的开花季节使养团队得以发挥作用 迄今为止最受控制的授粉. 总共收获了5378个可存活的坚果! 与去年收获的1400颗坚果相比，这是一个显著的增长.
• 在允许的地点对92棵板栗属母树进行授粉 而去年是41人. 其中60棵是美洲栗树. 在60种授粉的美洲栗树中，有27种是新开花的树，因此做出了贡献 我们的多元化目标.
• 我们的合作伙伴进一步实现了达令58的多样化和生产 在缅因州，VT, in, PA, VA, SC和GA进行授粉的TACF. 一些 与TACF抗疫霉根腐病(Phytophthora root rot, PRR)回交树杂交 来测试我们是否能在后代身上积累抗枯萎病和抗PRR的能力.
• 采用不同背景的10种转基因花粉进行试验 授粉，主要产生T3种子. 花粉的一种 缅因州博士. 汤姆·克拉克，D58+20USU45.5、是一棵早开花的T3树 一年. 该花粉类型产生28个活果，产生第一代T4. 这一加速花粉生产的成果发表在TACF的《网赌平台》秋季刊上 杂志.
• 主要在纯美洲板栗母树上传粉 恢复的目标，但今年我们有足够的花粉来控制授粉 其他castania种和有趣的农业品种，包括阿勒格尼 chinquapin, Bouche de Betizac混血，Luvall的Monster混血，Bill的Chinese混血 混合动力车，举几个例子. 这些可能有助于未来的农业美洲板栗地区 杂交修复，美洲栗树的另一个价值.
• 近200个坚果是由Ozark Chinquapin母树和 亲爱的58花粉. 这些坚果将开始我们培育易受枯萎病影响的OxO的计划 帮助恢复这种同样遭到破坏的近亲物种 被栗子枯萎病.
• 发送了第一批使用冷冻野生型栗子花粉的实践授粉试剂盒 今年给了几个公民科学家志愿者. 这是预料之中的 达令58号花粉运输在解除管制后. 每个参与者都产生了可行的 为今后的花粉运输提供了有价值的反馈. 学习如何授粉 以及如何参与，请观看我们的虚拟授粉 车间: 美洲板栗恢复工程-授粉工作坊
• 从组织培养实验室，200多棵T2树被无性生产，其中许多 为了将来的分配而持有土地. 除了许多美洲栗子 我们的第一批美洲/欧洲杂交品种也进行了田间繁殖 测试. 欧洲板栗也容易受到枯萎病的影响，这是第一步 将氧氧基因带入该物种.
• 从2020年控制杂交中成功获得了13个新的、多样化的基因型 转入组织培养. 其中的两种文化包括了早期的t15 伤口/病原体诱导启动子系有助于靶向OxO的表达 感染部位. 我们希望这些培养物中的一些能成为花粉亲本 为了2022年的授粉季节

图1. 汉娜·皮尔基关于授粉的说明.

图2. 左:帕特里夏·费尔南德斯(博士后)和凯特琳·布雷达(行政助理)正在收割. 右图，Sarah Meisner和Kyra LoPiccolo(本科生)在铲斗升降机上装袋 雌花.

图3. 左图，美洲栗子/Bouche de Betizac杂交坚果作为收获的例子. 对，高光生长室快速产生花粉.

监管进展(Bill 鲍威尔教授兼Chestnut项目总监)

 

无论我们在研究或生产上取得多大的进步，每个人都一样 问题，我们什么时候能买到“达林”美洲栗树? 这已经 这是一个很难回答的问题，因为我们正在与三个监管机构合作 在美国.S. (加拿大很快也会有两家). 过去，监管机构只能告诉我们 审批的“典型”时间表. 然后他们说，美洲板栗不是典型的. 这将是第一个利用生物技术开发的修复树. 但这不会是最后一次. 达林的美洲栗树将为 拯救许多其他濒危树种，如美洲榆树等. 因此, 监管机构非常小心，对我们的树木进行了广泛的审查. 的 可爱的美洲栗树将是研究最多的树木品种之一 历史. 通过这样做，它将使未来恢复树木更容易和更快 因为监管者会更熟悉恢复的发展 树.

好消息是我们终于得到书面的决定日期了. 美国农业部的请愿书 于2020年1月17日(就在新冠疫情爆发之前)提交. 我们经历了两次公开募股 在最后的公告中，他们写下了他们期待工厂的时间 完成有害生物风险评估(PPRA)和环境影响报告书(EIS) 并作出决定，“我们计划在6个月内完成PPRA，以及环境影响报告书和 决定记录(ROD)在本通知发出之日起2年内. 这个时间表 是暂定的，可以延期吗.“所以这将使PPRA在2月份左右 2022年和2023年8月左右的ROD.

在完成EPA要求的额外实验后，我们提交了19卷 (4,525页)注册并豁免于21年9月28日向EPA申请公差. 这将启动一个强制性的审查时钟，并被告知这将完成 12月. 2022. 与此同时，我们正在提交一份申请，要求获得FIFRA 250亿美元的豁免 按照环保局监管机构建议的程序. 我们希望提交这份请愿书 下个季度开始平行审查过程. 这两篇评论是共享的 信息，但是独立的结果，我们可以开始分配树 登记，同时等待25b豁免.

在与FDA进行多次讨论并完成他们要求的实验后， 我们已于10/27/21提交谘询文件. 我们期待这一审查过程 大概需要一年的时间. 此外，我们正在提交一份单独的豁免请愿书 从小麦食品标签规则中我们只添加了一个基因 会在他们要求的几个实验之后提交吗.

所以，总而言之，我们希望有所有的监管决定需要分销 以公众为中心 2023年秋天. 祈祷. 我和我的团队感谢我们的支持者的耐心和鼓励 继续经历这个漫长的过程. 树来了!

今年的出版物

• 卡尔森、埃里克、克里斯汀·斯图尔特、凯瑟琳·拜尔、琳达·麦圭根、托比·卡尔佩珀二世、 和威廉·鲍威尔. 2021. 病原菌诱导的抗疫病转基因的表达 美洲板栗. 分子植物病理学. (新闻)
• 克拉克，托马斯，艾伦·斯皮尔斯和威廉·鲍威尔. 2021. 转基因花粉在少于 一年. 栗杂志. 2021年秋季的问题.
• 安德鲁·纽豪斯.安娜斯塔西娅·E. Allwine, Allison D. 奥克斯，达科塔F. 马修斯,斯科特 H.麦卡特和威廉. 鲍威尔. 2021. 大黄蜂(Bombus Impatiens)存活，花粉 草酸氧化酶在实际浓度下的使用和繁殖不受影响 源自美洲板栗(Castanea Dentata)花粉. 转基因研究: http://doi.org/10.1007/s11248-021-00263-w.
• 纽豪斯,. 和W. 鲍威尔 (2021) "Intentional introgression of a blight tolerance 转基因拯救美洲板栗残余种群>，《博彩平台#########关于》 和练习3(4):e348. http://conbio.onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1111/csp2.348